论文解读--金银花各组分在体内外抗石斑鱼虹彩病毒活性的研究


今天跟大家分享一篇文章:金银花各组分在体内外抗石斑鱼虹彩病毒活性的研究,文章引用信息如下:


石斑鱼虹彩病毒,在养殖石斑鱼中致死率较高,因此迫切需要有效的药物来控制石斑鱼虹彩病毒感染。金银花(L.japonica)是一种著名的药用植物。本研究从中国广西的石斑鱼中提取了虹彩病毒(SGIV-Gx)并评估了金银花各组分在抗SGIV-Gx感染中的应用。

金银花组分效应浓度的确定


通过光镜观察和CCK-8溶液测定细胞活性确定了金银花各组分最安全,适宜的效应浓度。(LAE ≤ 10 mg/mL, CGA ≤ 250 μg/mL,CCGA≤500 μg/mL, IAA ≤ 250 μg/mL, IAB ≤ 250 μg/mL,IAC ≤ 500 μg/mL, CA ≤ 125 μg/mL)

金银花各组分对杂交石斑鱼组织学的影响




腹腔注射金银花组分10天后的石斑鱼,其肝脏和脾脏组织没有病理变化。

利用核酸适配体Q3荧光分子探针(Q3-AFMP)特异性检测SGIV-Gx感染


流式细胞仪检测结果显示,靶细胞SGIV-Gx的荧光强度随SGIV-Gx感染时间的延长而增强,表明Q3-AFMP可监测SGIV-Gx的感染过程。

利用光镜分析金银花组分抗病毒活性


光镜观察发现正常GS细胞无细胞病变作用;SGIV-Gx,SGIV-Gx+CGA,SGIV-Gx+CCGA三组出现大量细胞病变作用;SGIV-Gx与其它各组分(LAE,10mg/mL;IAA,250μg/mL;IAB,250μg/mL;IAC,500μg/mL;CA,125μg/mL;LT,500μg/mL;IS,500μg/mL)共孵育的细胞中出现少量细胞病变作用。

利用Q3-AFMP分析金银花组分抗病毒活性


实验结果显示CGA与CCGA对细胞荧光强度几乎无影响,其他组分(LAE、IAA、IAB、IAC、CA、LT和IS)使细胞的荧光强度显著降低,表明这些成分具有抗SGIV-Gx感染的活性。

利用RT-qPCR分析金银花组分抗病毒活性


实验结果显示一些组分(LAE,IAA,IAB,IAC,CA,LT,IS)使MCP基因在GS细胞中的表达显著下降,这表明这些组分能显著抑制SGIV-Gx感染。此外,有趣的是,在某些工作浓度下,CGA(62.5-125μg/mL)和CCGA(125-250μg/mL)甚至可以促进MCP基因表达和病毒复制。

金银花各组分对SGIV-Gx感染的抑制率


根据RT-qPCR的抗病毒活性结果,进一步评价了在安全工作浓度下,各组分对SGIV-Gx感染的抑制率。结果表明,金银花的组成成分(LAE、IAA、IAB、IAC、CA、LT)对SGIV-Gx感染具有最有效的抗病毒活性。

金银花组分对SGIV-Gx的体内抗病毒活性


选择金银花组分LAE,IAC和LT进行体内抗SGIV-Gx活性评价。各组存活率如图所示,实验结果表明金银花组分在体内对SGIV-Gx感染具有保护作用。

总结:
本研究首先确定了金银花各组分的安全、适宜效应浓度。然后采用光镜、Q3-AFMP和RT-qPCR三种方法分析了金银花各组分对SGIV-Gx感染的抑制作用,结果表明,金银花部分成分(LAE、IAA、IAB、IAC、CA、LT、IS)对SGIV-Gx感染具有较好的抗病毒活性,抑制率达90%以上。本研究的结果表明,金银花的成分具有抗病毒作用,金银花可用于开发防治养殖石斑鱼SGIV-Gx感染的有效药物。