论文解读--草鱼呼肠孤病毒抗原表位的筛选及其对草鱼的免疫保护评估


今天跟大家分析一篇文章:草鱼呼肠孤病毒抗原表位的筛选及其对草鱼的免疫保护评估,文章引用信息如下:


草鱼呼肠孤病毒(GCRV)引起的出血病对水产养殖业造成了巨大的经济损失,被认为是对草鱼养殖威胁最严重的疾病之一。目前,接种疫苗是对抗GCRV感染和提高草鱼产量的最有效的方法。本研究将GCRV-II的VP4基因分为4个片段,分别在大肠杆菌中表达,用酶联免疫吸附试验(ELISA)筛选潜在抗原表位,并以碳纳米管为载体,研究了其对草鱼抗GCRV-II感染的保护作用。

一、抗原表达与鉴定



(A)重组质粒的鉴定;(B)重组蛋白的表达;(C)VP4蛋白的蛋白免疫印迹结果;(D)VP4蛋白片段的蛋白免疫印迹结果

二、VP4和VP4-3的免疫原性



ELISA测定结果显示VP4-3蛋白的含量最高,表明VP4-3具有最强的抗体结合能力,是GCRV-II的潜在抗原表位。

三、血清抗体的产生



接种后草鱼的血清抗体水平

ELISA结果显示抗体水平随着疫苗浓度的增加和免疫时间的延长而增加,每个组的抗体水平在接种后3周达到最高浓度,然后逐渐减弱。此外,SWCNTs-VP4和SWCNTs-VP4-3疫苗接种组的抗体水平显著高于对照组和VP4组。

四、疫苗诱导的免疫应答



结果表明,与裸露的VP4亚单位疫苗相比,SWCNTs-VP4亚单位疫苗能诱导草鱼产生更好的免疫应答。此外,与SWCNTs-VP4组相比,SWCNTs-VP4-3治疗组的免疫相关参数水平更高。

五、免疫基因的表达



qRT-PCR分析接种不同疫苗制剂的草鱼其免疫相关基因的表达

六、疫苗的免疫保护率



接种草鱼的相对存活率

在感染10天后,SWCNTs-VP4-3处理的草鱼存活率为76.7%,而SWCNTs-VP4和对照组的存活率分别为58.3%和0%,显示疫苗具有较好的免疫保护效果。

总结
研究结果表明,与裸露的VP4亚单位疫苗相比,SWCNTs-VP4亚单位疫苗能诱导草鱼产生更好的免疫应答。此外,与SWCNTs-VP4组相比,SWCNTs-VP4-3治疗组的免疫相关参数水平更高。在感染10天后,SWCNTs-VP4-3处理的草鱼存活率为76.7%,而SWCNTs-VP4和对照组的存活率分别为58.3%和0%。这些结果表明SWCNTs-VP4-3可能是预防和控制草鱼GCRV-II的一种候选药物。