论文解读——B族链球菌的定植和致病性与Cas9 有关



无乳链球菌属于B 族链球菌(GBS),是一种人,畜,鱼共患的致病菌。在人体中,主要定植于消化道与生殖道,并通过孕妇产道感染初生婴儿,引起脑膜炎与败血症,其主要的致病菌株为ST-17型。近年来,在水生动物体内也频繁分离到该菌,尤其是自2007年以来,该菌每年都在中国广东、海南、福建、广西等罗非鱼主要养殖区暴发流行,近年来,亦发现水产品中会携带ST-17型链球菌。
  CRISPR/Cas是细菌抵御外源DNA的一种机制,在2型CRISSPR干扰下,Cas9具有DNA内切酶活性,在gRNA引导下,水解外源DNA。近年来,越来越多的报道证实Cas9与细菌的毒力,免疫逃避以及宿主病原互作相关。今天给大家介绍的一篇文章,就是探讨Cas9 在GBS致病性及定植中的作用,结果如下:

1、构建ST-17 GBS Cas9缺失株:△cas9株在培养基中生长以及荚膜的产生与野生株无明显差异



2、GBS的感染与在阴道的存活时长与Cas9 相关:COH1△cas9株相对于野生株,穿透脑组织的能力减弱了(Figures 2A,B)。相较于COH1△cas9株,野生株在小鼠阴道中存活数量更多,持续的时间更长(Figure2D)



3、GBS Cas9参与宿主的相互作用:体外用hCMEC细胞模拟人血脑屏障,△cas9株的黏附性与野生株无明显差异,但入侵hCMEC细胞的能力明显降低(Figures3A,B);体外用hVEC模拟人生殖道环境,△cas9株的黏附性显著降低,但入侵hVEC细胞的能力与野生株无明显差异(Figures3C,D)



4、Cas9 对GBS基因表达的影响:野生株与△cas9株,存在353个基因差异表达,包括双组分系统相关基因,细胞壁形成相关基因。这些结果通过RT-PCR进行验证,表明Cas9 可以显著性的调控GBS一些基因的表达



5、CiaR 双组分系统调控因子,在△cas9株中显著下调