[每周一例]鳜“睡觉鱼”检出病毒性神经坏死病毒(VNNV)


[病例513]广东省佛山市南海区丹灶镇一口鳜鱼养殖池塘,面积5亩(图1),2019年7月22日放鳜鱼苗3.3万尾,规格4cm左右,放苗时外用 “激活”抗应激,投喂鲮鱼仔。

放苗之后多为白撞雨天气,水温大约29~32℃,一直没有调水稳水,也没有用过其他药物。

7月27日,发现少量桂花鱼苗不吃鱼仔,“收肚”明显,有部分鱼上浮平游,之后在水面侧躺,养殖户称为“睡觉鱼”;用“优肽”1瓶/亩处理一次。

7月28日,不追鱼吃,少量死亡;

7月29日,死亡约120多尾;

7月30日,水温30℃,死亡约120尾;

7月31日,中午水温30.4℃,估计死亡100尾,上午11点塘头检测水质指标,pH值8.0,亚硝酸盐0.15mg/L,氨氮无(图2),溶氧7.01mg/L,追鱼吃食情况好了很多。水面上能看到部分平游鱼和“睡觉鱼”(图3),少数严重黑身的病鱼沿圆形轨迹快速打转。多数发病鱼黑身,腹部凹陷(“收肚”),有的眼睛充血或出血而发红,有的肛门发红。解剖见空肠空胃,部分鱼肠道有黄色积液(图4)。

取6尾发病鱼,分别从肝脏和脑组织接种至胰蛋白胨大豆琼脂培养基(TSA),进行细菌分离培养;取脑、眼及内脏组织用95%酒精固定PCR方法检测病毒;取脑、眼及内脏组织波恩氏液固定做组织病理切片观察。结果:30℃室温条件下培养24小时,部分病鱼脑和肝脏长出优势菌落(图5),经16S rDNA测序鉴定,编号“1-1脑”为芽孢杆菌属(Bacillus sp.);“1-3肝”为透明藉伏氏菌(Vogesella perlucida),“1-5肝”为气单胞菌属(Aeromonas sp.);病鱼的眼、脑组织经深圳动检贾鹏博士和公司研究所一室PCR检测病毒性神经坏死病毒(VNNV)呈强阳性,弹状病毒(SCRV)、传染性脾肾坏死病毒(ISKNV)、大口黑鲈虹彩病毒(LMBV)呈阴性;组织病理切片结果见发病严重的鱼脑组织和眼组织细胞坏死,形成空泡或空泡化,部分发病鱼肠道上皮崩解(图6)。

8月2日,泼洒 “优肽”1瓶/亩,每天1次,连续2次,之后死亡逐渐减少,情况好转。

分析:1、今年广东鳜鱼养殖区都发生了一种以在水面“睡觉”为主要症状的鳜鱼疾病,大家习惯上称“睡觉病”或“睡觉鱼”,池塘发病率较高,病因也说法不一。本案例通过现场发病鱼的症状观察、多个发病池塘的流行病学调查和实验室检测结果,初步诊断该病是由病毒性神经坏死病毒引起的。

2、现场细菌分离培养结果表明,本案例发病鱼已经继发细菌感染,鉴定的3株细菌的致病性尚不清楚,在本案例中鳜鱼苗发病和死亡中起到的作用尚不明确。(利洋水产药店 丹灶店 梁万里 研究所 戚瑞荣 张会军 王小霞 提供 2019.8.15)